Aspekte differenzierter Stammzellen für die Rekonstitution in vivo

Unser Ziel war es, ein In-vitro-Differenzierungssystem zu etablieren, um embryonale Stammzellen (ES-Zellen) der Linie BALB/c IgM-/- für die Lymphozytenentwicklung vorzubereiten. Wir haben die BALB/c IgM-/- ESC-Linie mittels Fluoreszenz-aktivierter Zellsortierung (FACS) und Epifluoreszenz auf Marker der Pluripotenz untersucht. So haben wir diese Zelllinie hinsichtlich der Expression der kongenischen Marker CD45.1 und CD45.2 auf ihrer Oberfläche charakterisiert. Da die B-Zell-Entwicklung im Knochenmark stattfindet, sollten die differenzierten embryonalen Stammzellen die Fähigkeit besitzen, nach dem Transfer in die Entwicklungsnischen zu wandern. Daher untersuchten wir die Homing-Fähigkeit mittels Transwell-Migrationsassays gegen das C-X-C-Motiv-Chemokin 12 (CXCL12 = SDF1), das einen starken Lockstoff für Stammzellen und Vorläuferzellen darstellt und die Zellen zu ihren Entwicklungsnischen im Knochenmark leitet.