Caracterização molecular de bactérias produtoras polihidroxibutirato
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Os polihidroxibutiratos são biopolímeros com potencial para serem utilizados como plásticos biodegradáveis, em substituição dos plásticos sintéticos. A presente investigação foi realizada com o objetivo de isolar bactérias produtoras de polihidroxibutirato e analisar a diversidade entre elas, relacionada com a sequência do gene da PHB sintase. As amostras de solo e água para o isolamento das bactérias foram recolhidas em catorze fontes diferentes. De entre cem isolados bacterianos, quarenta revelaram-se produtores de PHB após um rastreio inicial baseado em fluorescência em meio contendo azul do Nilo A. Ao testar diferentes combinações de fontes de carbono e azoto, verificou-se que 2 g de glicose como fonte de carbono e 0,65 g de nitrato de potássio eram as mais adequadas. Foram selecionadas as seis melhores estirpes acumuladoras de PHB e caracterizadas para a otimização dos meios de produção de PHB. As estirpes selecionadas produziam 59-29% de PHB em relação ao peso seco do sedimento celular. Foram testadas diferentes combinações de subprodutos agrícolas como fonte de carbono para uma produção de PHB economicamente viável, tendo-se verificado que 3 g de melaço constituíam a melhor fonte de carbono para a produção de PHB (60% do peso seco das células). A amplificação por PCR foi realizada com primers específicos do gene da PHB sintase, utilizando ADN genómico das estirpes selecionadas.
Os polihidroxibutiratos são biopolímeros com potencial para serem utilizados como plásticos biodegradáveis, em substituição dos plásticos sintéticos. A presente investigação foi realizada com o objetivo de isolar bactérias produtoras de polihidroxibutirato e analisar a diversidade entre elas, relacionada com a sequência do gene da PHB sintase. As amostras de solo e água para o isolamento das bactérias foram recolhidas em catorze fontes diferentes. De entre cem isolados bacterianos, quarenta revelaram-se produtores de PHB após um rastreio inicial baseado em fluorescência em meio contendo azul do Nilo A. Ao testar diferentes combinações de fontes de carbono e azoto, verificou-se que 2 g de glicose como fonte de carbono e 0,65 g de nitrato de potássio eram as mais adequadas. Foram selecionadas as seis melhores estirpes acumuladoras de PHB e caracterizadas para a otimização dos meios de produção de PHB. As estirpes selecionadas produziam 59-29% de PHB em relação ao peso seco do sedimento celular. Foram testadas diferentes combinações de subprodutos agrícolas como fonte de carbono para uma produção de PHB economicamente viável, tendo-se verificado que 3 g de melaço constituíam a melhor fonte de carbono para a produção de PHB (60% do peso seco das células). A amplificação por PCR foi realizada com primers específicos do gene da PHB sintase, utilizando ADN genómico das estirpes selecionadas.
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