Quinze milieux biphasiques différents ont été utilisés pour cultiver le parasite promastigote de Leishmania donovani et comparés au milieu NNN ordinaire, afin de déterminer si un milieu à base de gélose au lait de vache pouvait offrir une culture aussi bonne que le milieu ordinaire. Le lait est en effet une source simple, bon marché et riche en protéines, glucides, lipides et calcium. Cependant, le lait ne peut se substituer au sang de lapin en tant que phase solide, car c'est ce dernier qui a permis d'obtenir le plus grand nombre de parasites lors de son utilisation. De plus, l'utilisation de 10 % d'urine humaine comme phase liquide peut multiplier par huit le taux de croissance du parasite, ce qui réduit le temps nécessaire à sa culture dans le milieu NNN standard. Ainsi, l'utilisation d'un milieu NNN modifié BHU (milieu utilisant du sang de lapin comme phase solide et 10 % d'urine humaine comme phase liquide) en laboratoire permet de réduire la durée de culture du parasite Leishmania.
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