Identificazione e valutazione di biomarcatori per la diagnosi del cancro alla vescica

Il cancro alla vescica (UBC) è il quinto tumore più diffuso nei paesi occidentali. Sono stati compiuti sforzi costanti per sviluppare biomarcatori urinari non invasivi, dotati di elevata sensibilità e specificità, in grado di migliorare la qualità della vita dei pazienti, ridurre i costi e diminuire il numero di cistoscopie. Questi biomarcatori possono quindi essere utilizzati come parte di un pannello multi-biomarcatore per sviluppare un test delle urine per la diagnosi dell'UBC, poiché un singolo marcatore non è in grado di sostituire gli attuali strumenti diagnostici invasivi. Utilizzando un approccio proteomico (LC-MS/MS), sono stati analizzati 8 secretomi di cellule di UBC e 1 di cellule vescicali normali per identificare le proteine secrete che possono essere potenziali biomarcatori candidati. Il forbol 12-miristato 13-acetato (PMA; attivatore della PKC) è stato utilizzato per trattare i secretomi interi e studiare tutte le proteine rilasciate dalle cellule, mentre i secretomi trattati con l'inibitore ad ampio spettro Marimastat sono stati sottoposti a ultracentrifugazione per concentrarsi sulle proteine secrete. La quantificazione delle proteine si è basata sulla marcatura con isotopi stabili mediante demetilazione dei peptidi. Sono stati utilizzati due metodi per selezionare i biomarcatori candidati: Human Protein Atlas e Ingenuity Pathway Analysis.