Identyfikacja i ocena biomarkerów s¿u¿¿cych do wykrywania raka p¿cherza moczowego

Rak p¿cherza moczowego (UBC) jest pi¿tym najcz¿¿ciej wyst¿puj¿cym nowotworem w krajach zachodnich. Nieustannie podejmowane s¿ wysi¿ki maj¿ce na celu opracowanie nieinwazyjnych biomarkerów opartych na badaniu moczu, charakteryzuj¿cych si¿ wysok¿ czu¿o¿ci¿ i swoisto¿ci¿, które poprawi¿yby jako¿¿ ¿ycia pacjentów, obni¿y¿yby koszty leczenia oraz zmniejszy¿y liczb¿ cystoskopii. Mo¿na to nast¿pnie wykorzystä jako cz¿¿¿ panelu wielu biomarkerów w celu opracowania testu moczowego do diagnozy UBC, poniewä pojedynczy marker nie jest w stanie zast¿pi¿ obecnych inwazyjnych narz¿dzi diagnostycznych. Stosuj¿c podej¿cie proteomiczne (LC-MS/MS), przeanalizowano 8 sekretomów komórek UBC i 1 sekretom normalnych komórek p¿cherza moczowego w celu zidentyfikowania wydzielanych biäek, które mog¿ by¿ potencjalnymi kandydatami na biomarkery. 12-mirystynian 13-octanu forbolu (PMA; aktywator PKC) zostä u¿yty do obróbki cäych sekretomów i zbadania wszystkich biäek uwalnianych przez komórki, podczas gdy sekretomy poddane dziäaniu inhibitora o szerokim spektrum dziäania, Marimastatu, zostäy poddane ultracentryfugacji w celu skupienia si¿ na biäkach uwalnianych. Oznaczenie ilo¿ciowe biäek oparto na znakowaniu izotopami stabilnymi poprzez demetylacj¿ peptydów. Do wyboru potencjalnych biomarkerów wykorzystano dwie metody: Human Protein Atlas oraz Ingenuity Pathway Analysis.