Klonowanie TA

Wykorzystali¿my technik¿ klonowania TA genu odpowiedzialnego za oporno¿¿ na antybiotyki, tj. oporno¿¿ na kanamycyn¿, wykonuj¿c podstawowe kroki zwi¿zane z procesem klonowania. T¿o wynalazku Podstawowym wymogiem skutecznej in¿ynierii genetycznej bakterii i innych komórek rozmnäanych w kulturach komórkowych jest zdolno¿¿ do selekcji komórek z okre¿lon¿ zmian¿ genotypow¿. Najcz¿stsz¿ strategi¿ selekcji w technologii rekombinacji DNA jest w¿¿czenie markera selekcyjnego do wektora klonuj¿cego lub plazmidu. Markerem selekcyjnym mo¿e by¿ sklonowany gen lub sekwencja DNA, która umo¿liwia oddzielenie komórek gospodarza zawieraj¿cych marker selekcyjny od tych, które go nie zawieraj¿. Marker selekcyjny wraz z odpowiedni¿ po¿ywk¿ selekcyjn¿ utrzymuje wektor klonuj¿cy w komórkach. W przeciwnym razie, poniewä replikacja plazmidów jest obci¿¿eniem energetycznym dla gospodarza bakteryjnego, w rosn¿cych kulturach bakterie, które utraci¿y plazmid, miäyby przewag¿ wzrostu nad komórkami z plazmidem.