Optymalizacja podwójnej immunofluorescencji dla tkanek nowotworowych

Rak pozostaje nierozwi¿zan¿ kwesti¿ dla wspó¿czesnej medycyny. Kädego roku miliony ludzi, od dzieci po doros¿ych, umieraj¿, poniewä nowoczesne leczenie nie jest w stanie sprostä wyzwaniu. Badania musz¿ by¿ kontynuowane w obszarze nowych biomarkerów nowotworów. Biologia molekularna rozwin¿¿a si¿ w ostatnich latach, jednak wiedza ta nie zostäa zastosowana w medycynie. Odkrycia biologiczne powinny by¿ wykorzystywane do poprawy diagnostyki i metod leczenia. W niniejszej publikacji wykorzystano ludzkie próbki raka jelita grubego i piersi utrwalone w formalinie i zatopione w parafinie w celu optymalizacji protoko¿u podwójnego barwienia immunofluorescencyjnego. Przeprowadzono równie¿ immunohistochemi¿ w celu wizualizacji wzorców ekspresji kädego biomarkera. W odniesieniu do podwójnej immunofluorescencji przetestowano równie¿ wykonalno¿¿ pierwotnych przeciwciä hodowanych u ró¿nych i tych samych gatunków gospodarzy. Wreszcie, ustalone metody jednoczesnego wielokolorowego obrazowania immunofluorescencyjnego utrwalonych w formalinie próbek zatopionych w parafinie zostäy zastosowane do wykrywania par potencjalnych biomarkerów raka jelita grubego (EGFR, pmTOR, pAKT, wimentyna, cytokeratyna Pan, ezryna, E-kadheryna) i raka piersi (sekuryna, PTTG1IP, rozszczepiona kaspaza 3, ki67).