Produzione di proteine ricombinanti: relazione ricerca su un caso studio

Il Plasmodium spp. e la Leishmania sono i parassiti responsabili della malaria e della leishmaniosi, due malattie molto diffuse che causano ancora milioni di casi ogni anno in tutto il mondo. Si ritiene che le proteine oggetto dello studio, AGAP007752-PA (Anopheles gambiae) e ¿-tubulina (Plasmodium spp. e Leishmania infantum), siano importanti per ridurre la trasmissione dei parassiti influenzandone il ciclo vitale. L'obiettivo è quello di utilizzare versioni ricombinanti di tali proteine per sviluppare nuove strategie di controllo volte a ridurre l'incidenza delle malattie. Al fine di approfondire la ricerca sull'AGAP007752-PA, il gene è stato amplificato, clonato e sequenziato. Successivamente, tutte e tre le proteine sono state espresse in E. coli e le proteine ricombinanti sono state analizzate mediante SDS-PAGE e Western Blot, verificandone nuovamente l'identità tramite sequenziamento. Dopo l'ottimizzazione delle procedure, è stata ottenuta l'amplificazione del gene AGAP007752, anche se questa proteina non è stata espressa con successo. Al contrario, le alfa-tubuline erano state precedentemente clonate e ora è stata ottenuta l'espressione delle proteine. La ricerca può essere portata avanti, sia attraverso la produzione della proteina ricombinante (AGAP007752-PA) sia attraverso la purificazione delle proteine ¿-tubulina ricombinanti espresse.