Sekwencja insercyjna Mycobacterium tuberculosis IS6110 metodą PCR RFLP

Gru¿lica (TB) jest g¿ówn¿ przyczyn¿ ¿mierci na ¿wiecie spowodowan¿ przez Mycobacterium tuberculosis (M. tb). Wed¿ug WHO gru¿lica zabija 5000 osób dziennie i oko¿o trzech milionów osób rocznie. Cz¿sto¿¿ wyst¿powania gru¿licy w Pakistanie ro¿nie z dnia na dzie¿. Pojawienie si¿ szczepów MDR M. tb jest bardzo niepokoj¿ce z epidemiologicznego punktu widzenia. Oporno¿¿ M. tb na antybiotyki wynika z mutacji w niektórych genach. W tym badaniu mutacje zwi¿zane z oporno¿ci¿ na etambutol (EMB) okre¿lono za pomoc¿ analizy RFLP. Badano zmiany w pozycjach kodonowych 306 i 497 genu embB. IS6110 jest elementem insercyjnym, który wyst¿puje wy¿¿cznie u cz¿onków kompleksu M. tuberculosis (MTBC) i dziäa jako wäne narz¿dzie diagnostyczne w identyfikacji tych gatunków. DNA wyekstrahowano z kultury M. tb i poddano trawieniu enzymem restrykcyjnym PvuII. Nast¿pnie zbadano wzór RFLPs za pomoc¿ Southern blotting w celu sprawdzenia ró¿norodno¿ci. Liczba kopii IS6110 ró¿ni si¿ u tych izolatów. Izolaty M. tb z blisko spokrewnionych obszarów wykazuj¿ wi¿cej podobie¿stw w porównaniu z izolatami z odleg¿ych obszarów.