Transformacja bawelny za pomocą konstrukcji opartej na siRNA ukierunkowanej CLCuD

Bawe¿na jest wän¿ ro¿lin¿ uprawn¿. W ci¿gu ostatnich kilku lat pojawi¿a si¿ endemiczna choroba zwana CLCuD (Cotton Leaf Curl Disease). Stanowi ona ogromn¿ przeszkod¿ w uzyskaniu wysokich plonów bawe¿ny. Choroba ta jest wywo¿ywana przez grup¿ begomowirusów, a mianowicie Cotton Leaf Curl Disease (CLCuD). Aby rozwi¿zä ten problem, wypróbowano kilka metod hodowlanych i transgenicznych. Spo¿ród nich bardziej obiecuj¿ca okazäa si¿ interferencja RNA (RNAi). Zastosowanie interferencji RNA jest korzystne, poniewä technika ta jest przyjazna dla ¿rodowiska. W obecnych badaniach konstrukcja genetyczna oparta na RNAi zostäa przeksztäcona w dwóch elitarnych odmianach bawe¿ny MNH-786 i VH-289 w celu zwi¿kszenia odporno¿ci wirusowej na CLCuD. Przeksztäcenie konstrukcji w ro¿linach przeprowadzono metod¿ szczytow¿ p¿du za po¿rednictwem Agrobacterium. Pomy¿ln¿ transformacj¿ i integracj¿ konstrukcji RNAi opartej na amplikonie potwierdzono za pomoc¿ PCR w pokoleniu T1 i T2 przy u¿yciu specyficznych dla genu starterów. Zdolno¿¿ konstrukcji C2 do zwalczania wirusa potwierdzono za pomoc¿ PCR w czasie rzeczywistym z mianem CLCuD. Porównanie wskänika choroby wirusowej i miana wirusa potwierdzi¿o, ¿e ro¿liny wykazuj¿ce pozytywn¿ integracj¿ genu RNAi z minimalnymi objawami miäy równie¿ niskie miano wirusa.