Isolamento e caracterização de um promotor do gene da copalil difosfato sintase

O material apresentado diz respeito à clonagem do promotor e à identificação in silico de elementos cis-ativos localizados no gene da copalil difosfato sintase (CPS) da Salvia miltiorrhiza. A planta é interessante em termos médicos devido à sua significativa atividade biológica, dependente de compostos terpenóides conhecidos como tanshinonas. Como as vias metabólicas da biossíntese das tanshinonas não estão totalmente reveladas, decidimos decifrar o aspecto desconhecido da regulação transcricional da CPS, a enzima de importância crucial para a biossíntese das tanshinonas. Identificámos numerosos motivos cis-ativos, juntamente com fatores trans homólogos potencialmente ativos na regulação do gene CPS da S. miltiorrhiza. A análise dos genes dos fatores trans coexpressos com o CPS de A. thaliana e a sua comparação com os fatores trans identificados pelas pesquisas in silico do promotor CPS de S. miltiorrhiza não revelou nenhuma proteína comum. Para validar experimentalmente os resultados das pesquisas in silico, foi avaliada a influência da auxina, giberelina, ácido salicílico e alta concentração de sal na atividade do promotor: a expressão do gene gus foi medida 0, 12, 24, 48, 72 e 96 horas após o tratamento hormonal, ou durante uma exposição de 96 horas a 100 mM de NaCl.

Pagina's: 60, Paperback, Edições Nosso Conhecimento