Produção de proteínas recombinantes: um relatório pesquisa estudo caso
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Plasmodium spp. e Leishmania são os parasitas causadores da malária e da leishmaniose, duas doenças amplamente disseminadas que ainda são responsáveis por milhões de casos em todo o mundo a cada ano. As proteínas em estudo, AGAP007752-PA (Anopheles gambiae) e ¿-tubulina (Plasmodium spp. e Leishmania infantum), são consideradas relevantes na redução da transmissão de parasitas, pois afetam os seus ciclos de vida. O objetivo é usar versões recombinantes dessas proteínas para desenvolver novas estratégias de controlo para diminuir a incidência da doença. Para aprofundar a pesquisa sobre AGAP007752-PA, o gene foi amplificado, clonado e sequenciado. Depois, as três proteínas foram expressas em E. coli, e as proteínas recombinantes foram analisadas por SDS-PAGE e Western Blot, verificando novamente as suas identidades por sequenciamento. Após a otimização dos procedimentos, a amplificação do gene AGAP007752 foi alcançada, embora esta proteína não tenha sido expressa com sucesso. Por outro lado, as alfa-tubulinas já tinham sido clonadas anteriormente e a expressão das proteínas foi agora alcançada. A investigação pode ser aprofundada, seja através da produção da proteína recombinante (AGAP007752-PA), seja através da purificação das proteínas ¿-tubulina recombinantes expressas.
Plasmodium spp. e Leishmania são os parasitas causadores da malária e da leishmaniose, duas doenças amplamente disseminadas que ainda são responsáveis por milhões de casos em todo o mundo a cada ano. As proteínas em estudo, AGAP007752-PA (Anopheles gambiae) e ¿-tubulina (Plasmodium spp. e Leishmania infantum), são consideradas relevantes na redução da transmissão de parasitas, pois afetam os seus ciclos de vida. O objetivo é usar versões recombinantes dessas proteínas para desenvolver novas estratégias de controlo para diminuir a incidência da doença. Para aprofundar a pesquisa sobre AGAP007752-PA, o gene foi amplificado, clonado e sequenciado. Depois, as três proteínas foram expressas em E. coli, e as proteínas recombinantes foram analisadas por SDS-PAGE e Western Blot, verificando novamente as suas identidades por sequenciamento. Após a otimização dos procedimentos, a amplificação do gene AGAP007752 foi alcançada, embora esta proteína não tenha sido expressa com sucesso. Por outro lado, as alfa-tubulinas já tinham sido clonadas anteriormente e a expressão das proteínas foi agora alcançada. A investigação pode ser aprofundada, seja através da produção da proteína recombinante (AGAP007752-PA), seja através da purificação das proteínas ¿-tubulina recombinantes expressas.
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